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            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒

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            • 文件类型:Word文档
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            • 更新日期:2017-04-24
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            【猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒】具体介绍
             本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。

             

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒利用解释书

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒 试剂盒名称】

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒 试剂盒用处】

            定量血清、血浆及相干液体样本中花生四烯酸(AA)的含量

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒检测道理】

            本试剂盒采取双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本参加到预先包被白介素2受体β(IL2Rβ)透明酶标包被板中,温育足够时光后,洗涤除去未结合的成份,再参加酶标工作液,温育足够时光后,洗涤除去未结合的成份。顺次参加底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产品,在酸的感化下变成黄色,色采的深浅与样品中白介素2受体β(IL2Rβ)浓度呈正相干,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中白介素2受体β(IL2Rβ)含量。

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒 试剂盒构成】

            1

             

            酶标包被板

            12孔×8条

            7

            底物夜A

            6mL

            2

             

            标准品:200ng/ml

            0.6mL

            8

            底物夜B

            6mL

            3

             

            20倍浓缩洗涤液

            20mL

            9

            终止液

            6mL

            4

             

            标准品稀释液

            6mL

            10

            解释书

            1份

            5

             

            样本稀释液

            6mL

            11

            封板膜

            1张

            6

             

            酶标试剂

            6mL

            12

            密封袋

            1个

            备注:标准品用标准品稀释液顺次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml

             

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒须要而未供给的试剂和器材】

            1、37℃恒温箱

            2、 标准规格酶标仪

            3、 周详移液器及一次性吸头

            4、 蒸馏水

            5、 一次性试管

            6、 吸水纸

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒操作步调】

            1、豫备:从冰箱取出试剂盒,室温复温均衡30分钟。

            2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

            3、加标准品和待测样本:取足足数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔地位,在标准品孔中参加标准品50μL;待测样本孔中先参加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。

            4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

            5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此反复洗板4次(也可用洗板机按解释书操作洗板)。

            6、加酶标工作液:每孔参加酶标工作液50μL,空白对照孔不加。

            7、温育:反复4的操作。

            8、洗板:反复5的操作。

            9、显色:每孔先参加显色剂A 液50μL,再参加显色剂B液 50μL,37℃避鲜明色15min。

            10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反响(色采由蓝色立转黄色)。

            11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长丈量各孔的吸光值(OD值)。

            12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也能够利用各类利用软件来计算。终究浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒 样本请求】

            1、样本不克不及含叠氮钠(NaN3,由于叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的克制剂。

            2、标本收集后尽早进行提取,提取按相干文献进行,提取后应尽快进行实验。若不克不及急速实验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

            3、样本应充分别心,不得有溶血及颗粒。

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒留意事项】

            1、实验严格按照解释书的操作进行,实验成果剖断必须以酶标仪读数为准。

            2、酶标包被板开封后如未用完,应急速装入密封袋中加干燥剂保存。

            3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。

            4、切记样本已稀释5倍,计算成果乘以5才是样本实际浓度。

            5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,逾越此范围,为标准曲线延长计算所得,不做为准肯定量成果,请用特别稀释液稀释后测定精确成果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本终究浓度。

            6、若显色过浅,可恰当延长底物温育时光。

            7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要改换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰着微孔;不得反复利用封板膜。

            8、试剂盒保质期内利用,不合批号的试剂不得混用。

            9、底物B对光敏感,避免长时光裸露于光下。

             

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒操作法式榜样总结】

            豫备试剂,样品和标准品 

             

            参加豫备好的样品和标准品,37℃反响30分钟

             

            洗板4次,参加酶标试剂,37℃反响30分钟

             

            洗板4次,参加显色液A、B,37℃显色15分钟

             

            参加终止液

             

            15分钟之内读OD值

             

            计算

             

            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒检测范围】

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            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒规格】

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            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒储藏】

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            猴花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒有效期】

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            试剂盒3

             
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